Identifikácia markerov herpetickej infekcie u tehotných žien

Herpes infekcia môže byť hniezdiskom pre neplodnosť, pretože vírusy majú nepriaznivý vplyv na reprodukčné zdravie žien i mužov. Avšak aj na začiatku gravidity spôsobujú herpes vírusy vážne riziko intrauterinnej infekcie plodu a nepriaznivý výsledok tehotenstva [1, 4, 5, 7]. Vírus herpes simplex (HSV) je často príčinou neurologických, somatických a endokrinných problémov u novorodencov a starších detí [3]. Genitálna lokalizácia herpesu je obzvlášť nebezpečná, čo sa vyskytuje u gravidných žien v 7-35% prípadov [2, 6].

Cieľom tejto práce bolo preskúmať optimalizáciu diagnózy herpetických infekcií u gravidných žien so zaťaženou pôrodnou a gynekologickou históriou (AAA) v dynamike tehotenstva.

Bolo vyšetrených 74 opätovne tehotných žien: 49 primiparous a 25 multiparous. Vek pacientov je od 20 do 41 rokov. Všetky ženy mali OAGA a boli odoslané na MONIIAH s diagnózou "chronickej vírusovej infekcie herpes"; Štúdia sa uskutočnila v dynamike od 16 do 24 týždňov. tehotenstva.

Na identifikáciu markerov HSV sa použili virologické metódy (BCM), molekulárne biologické (PCR, real-time PCR) a sérologické (ELISA) metódy. Krvný, močový a urogenitálny výter bol študovaný ako klinický materiál od tehotných žien. O vírusovej záťaži v rôznych klinických materiáloch sa hodnotilo množstvo HSV DNA, ktoré sa stanovilo PCR-rt. Pre každú vzorku bola zaznamenaná hodnota Ct prahového cyklu (prahový cyklus je bod, v ktorom fluorescencia prekračuje hodnotu pozadia) a boli vypočítané mediány. Získané hodnoty prahového cyklu (Ct) boli porovnané s hodnotami štandardných kontrolných vzoriek so známym obsahom DNA vo vzorke. Na hodnotenie parametrov humorálnej odozvy sa sérová TIFA testovala na prítomnosť špecifických protilátok proti HSV (AT) tried IgM a IgG. Bola tiež stanovená aktivita protilátky, ktorá bola vyjadrená v titroch a avidita IgG-AT, ktorá bola hodnotená indexom avidity (AI).

Medzi zistenými tehotnými ženami bola vysoká miera infekcie: 43 (58%) zo 74 žien malo jednu alebo inú urogenitálnu infekciu (IGO) vírusovej a / alebo bakteriálnej etiológie. Metóda diagnostiky IGO - vedenia PCR s kvalitatívnym hodnotením výsledku. Podrobné vyšetrenie histórie odhalilo, že zmiešané IGO bolo zistené u 21 (28%) tehotných žien. Štruktúra infekcie zahŕňala celý rad patogénov UGO: Ureaplasma urealiticum, Micoplasma hominis, Toxoplasma gondii, Gardnerella vaginalis, Chlamidia trahomatis, Candida albicans, ľudský papilomavírus. U 22 (30%) tehotných žien bolo nájdené jediné pôvodné činidlo IGO: Ureaplasma urealiticum - u 15 (20,4%), Micoplasma hominis - 4 (5,4%). V tomto prípade sa pacientovi nevyslovoval žiadny klinický príznak infekcie. Gardnerella vaginalis sa zistila u 3 (4,2%) tehotných žien..

V prvej fáze vyšetrenia pacientov bola vykonaná porovnávacia analýza frekvencie detekcie priamych markerov HSV (infekčná aktivita vírusu a HSV DNA). Žiadna z týchto žien nemala počas vyšetrenia žiadne klinické prejavy genitálneho herpesu. Pacient bol považovaný za infikovaný, ak bol vírusový marker detegovaný aspoň v jednom zo študovaných klinických materiálov. Počas celého vyšetrovacieho obdobia malo 18 (24,3%) tehotných žien HSV markery. Zároveň bola detekovaná HSV DNA u 15 (20,3%) tehotných žien, infekčného vírusu - u 3 (4%) žien (obrázok 1). Rozdiely vo frekvencii detekcie HSV DNA v porovnaní s infekčným aktívnym vírusom boli štatisticky významné (str<0,05).

Bola stanovená frekvencia detekcie HSV v rôznych klinických materiáloch. 525 biologických materiálov od tehotných žien bolo vyšetrených na prítomnosť priamych markerov HSV: 175 krvných vzoriek, vzoriek moču a urogenitálnych výpalkov. Pri analýze všetkých študovaných vzoriek boli najčastejšie detekované všetky užitočné metódy (BKM, PCR a PCR-rt) pri urogenitálnych výpalkoch (27/175, 15,4%) a vzorky moču (20/175, 11,4%) , výrazne menej - v krvi (4/175, 2,3%, str<0,05).

Spolu s celkovým hodnotením bola vykonaná komparatívna analýza frekvencie detekcie markerov HSV v závislosti od metódy. HSV DNA bola detegovaná pomocou PCR v 16/525 (3%) vzorkách a PCR-rt v 30/525 (5,7%) vzorkách. Štatistická analýza ukázala, že metóda PCR-rt detegovala vírusovú DNA významne častejšie ako klasická metóda PCR (str<0,05). Инфекционно-активный вирус в биологических материалах (БКМ) обнаруживался значительно реже, чем ДНК ВПГ - в 5/525 (1%) пробах. Таким образом, чувствительность обнаружения ВПГ методом ПЦР-rt превышала чувствительность двух других использованных методов.

Nízka incidencia HSV v klinických vzorkách môže byť vysvetlená buď absenciou infekčného aktívneho vírusu v týchto vzorkách za prítomnosti vírusovej DNA, alebo nižšou citlivosťou metódy CTB v porovnaní s PCR.

Štúdie ukázali, že množstvo DNA, ktoré sa nachádza v moči a urogenitálnom šrotu, je vyššie ako množstvo DNA v krvných vzorkách. Keď štatistické spracovanie hodnôt rozdielov prahového cyklu (Ct) bolo štatisticky významné (str<0,05).

Štúdia krvného séra ukázala, že 64/74 (86,5%) tehotných žien malo protilátku anti-HSV-IgG počas počiatočného vyšetrenia. Protilátky proti HSV-IgG chýbali u 10 (13,5%) žien. U 2 (2,7%) tehotných žien sa pri počiatočnom vyšetrení navyše k IgG-AT detegovali protilátky triedy IgM, ktoré sú markermi akútnej fázy infekcie.

Pri hodnotení avidity IgG-AT sa zistilo, že u všetkých 64 (86,5%) žien, u ktorých bol zistený IgG-AT voči HSV, boli protilátky charakterizované vysokou aviditou (IA> 50).

Tehotné ženy boli vyšetrené v dynamike v troch štádiách tehotenstva: v druhom a treťom trimestri a pred pôrodom. Počas počiatočného vyšetrenia v druhom trimestri gravidity boli markery HSV a / alebo PCR detegované 12 (14,8%) žien s HSV markermi a / alebo PCR. U 8 (12,2%) tehotných žien sa detekcia markerov HSV kombinovala s detekciou vysoko nadýchaných IgG-AT (IA> 50) s vysokými titrami (1: 320). Zo skúmaných tehotných žien nebol IgG-AT detegovaný v dvoch, čo naznačuje primárnu infekciu..

Zmena koncentrácie IgG-AT alebo detekcia AT s vysokými titrami v krvných sérach štúdie v dynamike bola sprevádzaná identifikáciou priamych markerov HSV počas celého vyšetrenia u 3 tehotných žien. Jeden tehotný IgG-AT nebol nikdy detegovaný napriek identifikácii HSV markerov počas celej štúdie..

U 2 (3%) žien boli počas počiatočného vyšetrenia zistené priame markery HSV v kombinácii s IgM-AT. U jednej z týchto žien skončilo tehotenstvo spontánnym potratom v druhom trimestri..

V treťom trimestri tehotenstva boli po prvýkrát detegované HSV markery u 3 zo 74 tehotných žien. Sérologické vyšetrenie ukázalo, že jedna žena nemala proti HSV protilátky. Po ďalšom vyšetrení tejto tehotnej ženy sa objavil výskyt nízkych zanietených (IA<50) IgG-АТ с низкими титрами 1:20. Это указывало на первичное инфицирование. У 2-х пациенток произошла реактивация инфекции, при этом у одной были выявлены высокоавидные IgG-АТ с высокими титрами 1:320, у другой титр антител составил 1:20.

Posledný prieskum u žien pred pôrodom ukázal, že HSV markery boli prvýkrát zistené u 3 tehotných žien napriek prítomnosti protilátok proti HSV, čo poukazuje na opätovnú aktiváciu herpesovej infekcie.

U 4 (5,4%) boli počas vyšetrenia zistené gravidné HSV markery. Pri analýze vírusovej záťaže v klinických vzorkách sa zistilo, že u 2 tehotných žien sa vírusové zaťaženie s časom zvýšilo s nárastom v období gravidity: od 100 výtlačkov / ml počas počiatočného vyšetrenia na 10 000 výdajov na mliečok v poslednom vyšetrovacom období. Dve ďalšie zmeny vírusovej záťaže neboli zaznamenané..

Takže podľa získaných výsledkov, počínajúc druhým trimestrom gravidity, reagovalo 15 (20,3%) zo 74 tehotných žien s vírusovou infekciou herpesu. Primárna infekcia bola diagnostikovaná u 3 (4,0%) tehotných žien a 2 (2,7%) pacientov boli infikovaní v druhom trimestri gravidity a 1 (1,3%) v treťom. 49 (66,2%) tehotných žien malo asymptomatický transport. U 7 (9,5%) žien sa uvádzalo MONIIAG diagnostikované s chronickou HSV infekciou, HSV infekcia nebola prítomná počas tehotenstva (obrázok 2).

Sérologické vyšetrenie 74 tehotných žien v dynamike ukázalo, že reaktivácia herpetickej infekcie nie je vždy sprevádzaná identifikáciou vysokých titrov IgG-AT alebo zvýšením titrov dynamiky. Preto u 3 z 15 (40%) žien pri reaktivácii HSV boli detegované titre IgG-AT s nízkymi hodnotami (od 1:20 do 1:80).

zistenie

Frekvencia detekcie markerov herpetickej infekcie u tehotných žien závisí od použitých diagnostických metód (virologický, molekulárny biologický, sérologický) a zo študovaných diagnostických médií (krv, moč, urogenitálne škrabance). Molekulárne biologické metódy (PCR, PCR-rt) majú najväčšiu diagnostickú hodnotu pri štúdii materiálu z takých médií, ako sú moč a urogenitálne výtery.

Reaktivácia herpesovej infekcie nie je vždy sprevádzaná identifikáciou vysokých titrov IgG-AT alebo zvýšením titrov v priebehu času. To naznačuje nízku schopnosť tehotných žien v imunitnom systéme vyvinúť dostatočné množstvo protilátok aj v prítomnosti priamych markerov HSV a dokazuje potrebu imunokorektívnych opatrení u tehotných žien s vysokým infekčným rizikom.

Podľa materiálov www.rmj.ru/

literatúra

  1. Makatsariya A.D., Bitsadze V.O., Akinshina S.V. Syndróm systémovej zápalovej reakcie v pôrodníctve. M .: Med. Inf. Agency. 2006. str. 448.
  2. Nikonov A.P., Astsaturova O.R. Genitálny herpes a tehotenstvo // Gynekológia. 2002. zv. 4. č. 1. P. 4-6.
  3. Poletaev AV, Budykina TS, Morozov S.G. Infekcia matky ako príčiny fetálnej a novorodeneckej patológie // Alergológia a imunológia. 2001. V. 2. č. 2. P. 110-116.
  4. Zinzerling A.V., Melnikova V.F. Perinatálna infekcia: praktická príručka. Hands-on. Petrohrad: Epby Petrohrad, 2002, s. 352.
  5. Anzivino E., Fioriti D., Mischitelli M. a kol. Stav epidemiológie, epidemiológie, diagnostiky, prevencie a prevencie // Virol. J. 2009. Zv. 6. č. 40. P. 1-11.
  6. Bursrein D.N. Sekvenčne prenášané liečebné usmernenia // Current Opin. Pediatrics. 2003. Vol. 15. P. 391-397.
  7. Suligoi B., Cusan M., Santopadre P. a kol. HSV-2 špecifická séroprevalencia medzi rôznymi populáciami v Ríme v Taliansku. Talianske Fórum pre kontrolu herpií // Sex Transm. Nakaziť. 2000. zv. 76, str. 213-214.