Diagnóza protozoálnych infekcií

Nie všetky prvoky (protozoa), parazity u ľudí, sú príčinou chorôb. Na zistenie typu patogénu a potvrdenie klinickej diagnózy nemôže robiť bez metód laboratórnej diagnostiky. Najjednoduchší, ktorí sa usadili v ľudskom tele, môžu byť v rôznych fázach svojho vývoja.

Triedy parazitov a študované biomateriály

Najjednoduchšie sú rozdelené do 4 tried:

  • Kornogawks (Rhizopoda) - predstavujú améby u ľudí;
  • flagellata (flagellata) - hlavný patologický zástupca - Leishmania;
  • ciliata (ciliata) - najčastejší pôvodca ochorenia - balantidia;
  • sporozoa (sporozoa) - nebezpečný parazit tejto skupiny - plazmodíková malária.

Keď encystácia mikroorganizmu získa zaoblený tvar a je pokrytá ochranným plášťom. Vo forme cystov, protozoá sú menej náchylné na nepriaznivé faktory prostredia..

Lokalizácia patogénnych mikroorganizmov môže byť v rôznych štruktúrach orgánov a tkanív. Preto výber materiálu pre štúdiu závisí od toho, kde môže byť parazit.

Nasledujúce vyšetrovanie môže byť predmetom vyšetrovania:

  • krvi;
  • kostná dreň;
  • obsah abscesov (v pečeni, pľúcach, mozgu);
  • obsah dutín (brušnej, pleurálnej, perikardiálnej);
  • hlien;
  • moč;
  • cal;
  • hlienové a črevné exsudáty, fistuly.

Upozorňujeme: Existuje veľa diagnostických odrôd. Budeme uvažovať o typoch, ktoré sú najčastejšie v klinickej laboratórnej praxi..

Súkromná diagnostika

V každom konkrétnom prípade je laboratórny technik poverený nájdením konkrétneho patogénu a niekedy sú zistené iné na hlavnej ceste..

Diagnóza koreňových nožov (amébov)

Existuje 6 druhov tohto mikroorganizmu schopných žiť v ľudskom čreve. Iba úplavicová améba má klinický význam, nachádza sa v vegetatívnej forme a vo forme cysty..

Hlavným spôsobom detekcie parazitov je výskum v natívnom (neliečenom) biologickom prípravku..

Okrem toho sa používajú imunologické metódy:

  • nepriama imunofluorescencia;
  • nepriama aglutinácia (RNA);
  • radiálna imunodifúzia.

Upozorňujeme: sérologické metódy sú neinformačné a používajú sa len ako doplnok k hlavným v sporných prípadoch.

Diagnóza ciliárnych (ciliate)

Patogénna forma mikroorganizmov tohto rodu je balantidia. Ide o mikrób, ktorý spôsobuje balantidiózu - ochorenie sprevádzané ulceratívnym procesom hrubého čreva. Patogén je detegovaný v natívnom škvrne vo forme vegetatívnej formy a cyst. Materiál na roztieranie (výkaly a hlien) sa zhromažďuje počas rektoromanoskopického vyšetrenia a naočkuje sa na špeciálne médiá..

Odporučiť čítanie: Balantidiáza: príznaky, liečba a prevencia

Diagnóza flagellates (Leishmania, Giardia, Trypanosome, Trichomonas)

Pre ľudí, leishmania, trypanozómy, Giardia, Trichomonas.

Leishmania - mikróby, ktoré spôsobujú leishmaniózu, sa vyšetrujú v krvných škvrnách, materiáloch kostnej drene, kožných infiltrátoch. V niektorých prípadoch, keď sa diagnostikuje Leishmania, kultúra sa aplikuje na kultivačné médiá..

Odporúčame čítať: Leishmanióza: príčiny, symptómy, diagnóza, liečba a prevencia

trypanosome - príčiny spánkovej choroby (americká / africká trypanosomiáza alebo Chagasova choroba).

Africký variant je určený v počiatočnom období v štúdii periférnej krvi. Patologické mikroorganizmy s progresiou ochorenia sú v materiáli prepichnutia lymfatických uzlín v pokročilých štádiách - v mozgovomiechovej tekutine.

Príčinný činiteľ americkej trypanosomiózy v akútnej fáze ochorenia sa môže nachádzať vo forme flakóza. V budúcnosti sa mozgové parazity nachádzajú vo svalových bunkách, myokarde av neurónoch centrálneho nervového systému..

Na diagnostiku trypanozómov pre podozrenie na Chagasovu chorobu sa skúmaný materiál skúma pod mikroskopom pri malom zväčšení. Zároveň škvrny a hustá kvapka vopred natretá.

Giardia, vedúci parazitický životný štýl v dvanástniku sa nachádza v žlči alebo v analýze výkalov (cysty).

Odporúčame, aby ste si prečítali: Giardiáza: symptómy, liečba a diagnóza

Trichomonas (črevná, orálna, vaginálna) detegovaná mikroskopiou materiálov odobraných z postihnutých slizníc.

Sporovická detekcia (plazmodiová malária, kokcidózny pôvodca atď.)

Sporoviki - parazitické formy, ktoré žijú v bunkách, tkanivách a telesných dutinách.

Najbežnejším a najnebezpečnejším druhom pre človeka je malariálny plazmodium, ktorý má 4 hlavné typy patogénov: pôvodcu trojdennej malárie, štyri dni malárie, tropickej malárie a oválnej malárie.

Odporučiť čítanie: Malária: príčiny, príznaky, diagnostika, liečba a prevencia

Sexuálny vývoj plasmodia (sporogónia) sa odohráva v komároch Anopheles. Asexual (schizogónia tkanív a erytrocytov) - v pečeňovom tkanive a ľudských erytrocytoch. Tieto vlastnosti životného cyklu sa musia zohľadniť pri diagnostike malárie plazmodia..

Preto v prípade novo chorého pacienta, v krvi, možno zistiť zárodočné bunky sporogónneho cyklu. Ale vo výškach malarických záchvatov v krvi vo veľkých množstvách sa objavujú schizóny. 

Navyše sa v rôznych fázach horúčky malárie objavujú rôzne formy plazmodíka:

  • počas chladného obdobia je krv naplnená merozoitmi, druhom schizónov;
  • prstencové trophozoity sa hromadia v erytrocytoch vo výške teploty;
  • pokles teploty je charakterizovaný prevahou amoebných trophozoitov;
  • počas obdobia normálneho stavu obsahuje krv dospelé formy schizónov.

Štúdium pôvodcu malárie (Plasmodium malária) sa uskutočňuje v roztieraní av hustom kvapke.

Morfologické formy parazitov pre jasnú diferenciáciu sa analyzujú špecifickým farbením. Táto možnosť "vizualizácie" umožňuje zistiť jednotlivé morfologické vlastnosti konkrétneho druhu mikroorganizmu..

Upozorňujeme: Diagnóza malárie v štúdii šmúh a hustých kvapiek krvi je niekedy chybná. V niektorých prípadoch sa krvné doštičky môžu zameniť za patogén malárie. Plazmódové fragmenty leukocytov a iných buniek sú tiež niekedy simulované..

Základné výskumné metódy najjednoduchších

Stručne preskúmať najbežnejšie metódy výskumu pre prítomnosť najjednoduchších.

Diagnóza najjednoduchšej metódy natívneho náteru a náteru zafarbeného Lugolovým roztokom (vo výkaloch)

Liečivo sa pripravuje z emulzie výkalov v izotonickom roztoku. Dve kvapky chlóru sodného a roztoku Lugolu sa nanášajú na sklenenú podložku. Skúšobný materiál sa pridáva do obidvoch prípravkov pomocou drevenej tyčinky a po potiahnutí sklom je zobrazený v rôznych rozlíšeniach mikroskopu..

Podľa určitých charakteristík sa zistené prvoky zaznamenávajú. Pre presnosť pripravte 2-3 lieky z rovnakého materiálu. V pochybných prípadoch sa analýza opakuje niekoľkokrát počas 2-3 týždňov..

Metóda dokáže odhaliť vegetatívne a cysty:

  • Giardia;
  • Balantidium;
  • dysenterická améba.

Spolu s patogénnymi formami sa tiež stanovujú nepatogénne prvoky. Taktiež v zdravých nosičoch sú luminálne a cystické formy..

Je dôležité: Výskumy, aby sa zabránilo nepresnostiam a chybám, by sa mali vykonávať opakovane.

Výsledok diagnózy najjednoduchšej metódy natívnej a farebnej škvrny by mal obsahovať opis formy patogénu (luminálna, cystová, tkanivová).

Požiadavky na výskum:

  • zozbieraný materiál na analýzu (kvapalné výkaly) sa vyšetrí najneskôr 30 minút po defekácii;
  • zdobené výkaly musia byť diagnostikované do 2 hodín po defekácii;
  • nesmú byť v materiáli prítomné žiadne nečistoty (dezinfekčné prostriedky, voda, moč);
  • na prácu s materiálom sa používajú iba drevené palice, sklenené nie sú vhodné kvôli skĺznutiu slizu;
  • tyčinky by sa mali po použití okamžite spáliť..

Metóda konzervácie (fekálne vyšetrenie) pri diagnostike prvokov

Štúdia sa uskutočňuje fixáciou prvokov konzervačným činidlom. Táto metóda sa líši od predchádzajúcej v tom, že konzervačné látky vám umožňujú dlhodobo udržiavať liek.

Použité konzervačné látky:

  • Barrow. Obsahuje konzervačné prísady: 0,7 ml chloridu sodného, ​​5 ml formalínu, 12,5 ml 96% alkoholu, 2 g fenolu a 100 ml destilovanej vody. Farbivo: 0,01% roztok tionónu (azura).
  • Safarlievovo riešenie. Zloženie: 1,65 g síranu zinočnatého, 10 ml formalínu, 2,5 g kryštalického fenolu, 5 ml kyseliny octovej, 0,2 g metylénovej modrej a 100 ml vody. Táto konzervačná látka sa používa v prípadoch, keď sa materiál musí skladovať dlhšie ako mesiac..

Prázdne injekčné liekovky sa naplnia konzervačným činidlom, materiál sa do nich prenesie v pomere 3: 1, v prípade potreby sa pridáva farbivo. Hodnotenie výsledkov získaných pri štúdiu 2-3 liekov.

Metóda obohatenia formalínom a éterom (analýza prítomnosti prvokov vo výkaloch)

Táto diagnostická metóda vám umožňuje oddeliť a koncentrovať jednoduché cysty. Na analýzu sú potrebné nasledujúce zložky: formalín (10 ml), 0,85 g izotonický roztok, destilovaná voda, sírový éter, roztok Lugolu.

Zmes biomateriálu s uvedenými kvapalinami sa zmieša a odstredí. Zrazenina získaná na dne skúmavky sa zafarbí Lugolovým roztokom a skúma sa na prítomnosť cystov a vegetatívnych foriem..

Leishmaniova metóda (rozmazanie kostnej drene)

Nasledujúce činidlá sa používajú na diagnostiku leishmaniózy: zmes Nikiforova (sírový éter a etylalkohol), fosfátový tlmivý roztok, azur-eozín podľa Romanovského.

Látka z kostnej drene sa veľmi starostlivo umiestni na sklenenú šmýkačku po špeciálnej príprave. Použité mikroskop s ponorením.

V akútnom období ochorenia v punctate sa vyskytuje veľké množstvo leishmanie..

Upozorňujeme: niekedy krvné bunky môžu pripomínať spracovanú Leishmaniu, takže je veľmi dôležité, aby bol laboratórny technik opatrný a mal dostatok skúseností pre nezávislý výskum..

Metóda na detekciu Leishmanie v škvrne z infiltrácie kože

Nevyhnutné reagencie sú podobné predchádzajúcej analýze..

Skúšobný materiál sa získa z existujúceho obsahu tuberkulózy alebo vredov. Škrabanie na podozrenie na leishmaniózu sa vykonáva veľmi opatrne skalpelom bez krvi. Potom sa prípravok pripraví na skle. Pre presnosť získaných výsledkov sa súčasne skúma niekoľko liekov..

V prípade choroby sa stanovia makrofágy, fibroblasty, lymfoidné bunky prítomné v študovanom materiáli a Leishmania.

Spôsob izolácie čistej kultúry leishmanie získanej škrabaním patologických tkanív

Týmto spôsobom diagnostikovania najjednoduchšie škrabanie tkanív je umiestnený do špeciálneho živného média, v ktorom dochádza k aktívnej reprodukcii leishmanie..

Pred zhromažďovaním škrabancov je koža opatrne ošetrená alkoholom a na tuberkulu sa urobí rez, z ktorého je obsah odstránený a umiestnený do skúmavky s médiom. Materiál sa niekoľkokrát odoberie a potom sa umiestni do rôznych skúmaviek. Potom v termostate pri teplote 22-24 stupňov nastane kultivácia. Výsledky sa hodnotia pod mikroskopom. Táto metóda sa používa, keď iné, lacnejšie a rýchlejšie spôsoby diagnostiky najjednoduchších sú neúčinné..

Ak chcete zistiť, ako v praxi sú testy na prítomnosť tých najjednoduchších kvapkami krvi dešifrované, môžete sledovať videozáznam: 

Lotin Alexander, lekár